巨噬細(xì)胞集落刺激因子（M-CSF）是一種19.02kDa的造血生長(zhǎng)因子，含有162個(gè)氨基酸殘基。該蛋白的活性：形式為同源二聚體，由成骨細(xì)胞分泌。M-CSF可控制單核細(xì)胞、巨噬細(xì)f胞和骨髓祖細(xì)胞的生成、分化和功能。M-CSF能夠通過(guò)結(jié)合其受體CSF-1R激活CSF-1信號(hào)通路。
標(biāo)記：
1.將細(xì)胞培養(yǎng)基與EdU溶液按照500：1的比例混合，制成2×EdU標(biāo)記培養(yǎng)基。
2.提前將2×EdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱，然后將150微升2×EdU標(biāo)記培養(yǎng)基與等體積細(xì)胞培養(yǎng)基混合，獲得1×EdU溶液。
【注】：
①不建議替換全部培養(yǎng)基，這樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度。
②配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒(méi)過(guò)細(xì)胞為宜。
3.孵育細(xì)胞2h，棄培養(yǎng)基。
【注】：
①培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長(zhǎng)狀態(tài)。
②大多數(shù)腫瘤細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2 h的孵育時(shí)間。
4.以1xPBS清洗細(xì)胞兩次，每次5min, 以除去未摻入DNA的EdU殘留。
【注】：對(duì)于貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度。
應(yīng)用場(chǎng)景：
基礎(chǔ)免疫研究：用于體外誘導(dǎo)小鼠骨髓細(xì)胞分化為成熟巨噬細(xì)胞，構(gòu)建原代巨噬細(xì)胞培養(yǎng)體系，是免疫學(xué)機(jī)制研究的核心工具試劑。
藥物研發(fā)篩選：作為細(xì)胞活性因子，用于構(gòu)建巨噬細(xì)胞相關(guān)的藥物篩選模型，評(píng)估抗炎、免疫調(diào)節(jié)類(lèi)候選藥物的作用效果。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究：體內(nèi)注射用于調(diào)控小鼠體內(nèi)巨噬細(xì)胞數(shù)量與功能，構(gòu)建免疫相關(guān)疾病動(dòng)物模型，開(kāi)展體內(nèi)藥效學(xué)驗(yàn)證。
細(xì)胞工程應(yīng)用：配合GM-CSF等其他因子，用于體外大規(guī)模擴(kuò)增小鼠巨噬細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞，為細(xì)胞治療相關(guān)研究提供足量種子細(xì)胞。
產(chǎn)品特性：
高生物活性：重組表達(dá)產(chǎn)物與天然小鼠M-CSF活性高度一致，可在無(wú)血清培養(yǎng)體系中有效刺激骨髓細(xì)胞增殖。
高特異性：抗重組mGM-CSF的抗體可同時(shí)中和天然與重組蛋白的生物活性，無(wú)交叉反應(yīng)，特異性遠(yuǎn)高于動(dòng)物源提取的天然因子。
批次穩(wěn)定性好：重組工程化表達(dá)體系可實(shí)現(xiàn)大規(guī)模穩(wěn)定生產(chǎn)，批次間活性差異小于10%，避免天然提取產(chǎn)物的批次波動(dòng)問(wèn)題。
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